马铃薯怎么进行原生质体的融合? – 创业网-尊龙凯时登录首页

从马铃薯组织中获得原生质体。这通常涉及使用酶来分解细胞壁，释放质体。

原生质体融合是一种植物细胞实验室技术，用于融合两种不同的原生质体以实现遗传交换和杂交。以下是进行马铃薯原生质体融合的一般步骤。

1.原生质体的制备：

从马铃薯组织中获得原生质体。这通常涉及使用酶来分解细胞壁，释放质体。获得的原生质体均来自两个不同的马铃薯品种或来源。

2. 等离子测试：

在显微镜下检查原生质体的质量和数量。确保其结构健全且健康。

3、添加聚合剂：

将聚合剂，通常是聚乙二醇（peg），添加到原生质体悬浮液中。 peg有助于促进原生质体之间的融合。

4、融合过程：

将两种不同来源的原生质体悬浮液混合在一起，然后暴露于聚合剂以诱导原生质体融合。这通常需要一些时间，并且可能在某些温度和ph 条件下发生。

5. 合胞体筛选：

通常通过选择培养基中含有含有特定抗生素或其他标记物的合胞体的细胞来筛选合胞体。

6. 文化与隔离：

培养合胞体，并通过分离和传代培养将其分成单独的合胞体细胞群。这可能包括使用选择性培养基仅允许合胞体生长。

7、测试融合效果。

使用分子生物学技术，例如聚合酶链式反应(pcr) 或southern blotting，确定融合细胞中是否存在来自两种不同来源的基因。

原生质体融合是一项复杂的技术，其成功取决于多种因素，包括原生质体质量、融合类型选择和培养条件。这是植物育种和遗传改良中常用的技术，可用于引入新基因或改良现有基因。